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如何用凱氏定氮儀檢測大米蛋白質

   2020年06月24日 13:24  
  蛋白質含量是大米品質的指標之一。常用的檢測蛋白質含量的凱氏定氮儀一般用于檢測大豆、小麥和乳制品。凱氏定氮儀應該怎么檢測大米的蛋白質含量呢?
 
  試劑:
 
  鹽酸、氫氧化鈉、濃硫酸、硼酸、甲基紅:分析純
 
  溴甲酚綠:指示劑
 
  尿素:99.9%
 
  全麥粉粗蛋白質標準物質
 
  銅催化劑:4.5 g K2SO4+0.5 g CuSO4﹒5H2O/片
 
  試劑配置:
 
  1.鹽酸標準滴定溶液(0.1 mol/L) 按GB/T 601-2016配置及標定。
 
  2.氫氧化鈉溶液(400 g/L) 稱取4000 g氫氧化鈉溶于水,冷卻后稀釋至10 L。
 
  3.硼酸吸收溶液(含溴甲酚綠和甲基紅指示劑):
 
  (1) 1%硼酸:將100 g硼酸溶于10 L純水中。
 
  (2) 0.1%溴甲酚綠溶液:0.1 g溴甲酚綠溶于100 mL95%乙醇中。
 
  (3) 0.1%甲基紅溶液:0.11 g甲基紅溶液100 mL溶于 95%乙醇中。
 
  (4)在10L1%的硼酸溶液中加人100 mL1%溴甲酚綠和70 mL 1%甲基紅溶液混勻。
 
  試驗方法
 
  1.樣品制備 用中藥粉碎機粉碎大米,并過100目篩。
 
  2.單因素試驗 參考GB 5009.5- 2016及定氮儀簡報,用消化爐消化樣品,全自動凱氏定氮儀測定蛋白質。以蛋白質含量為指標,分別考察樣品質量、濃硫酸添加量、消化溫度、消化時間4個因素對大米蛋白質測定值的影響。
 
  3.正交試驗 根據單因素試驗結果選取合理水平設計正交試驗。
 
  4.精密度及準確度試驗 稱取6個平行樣品進行精密度試驗,稱取3個平行樣品,加入尿素純度標準物質進行加標回收試驗,同時利用全麥粉粗蛋白質標準物質考察準確度。
 
  5.數據處理試驗 數據用SPSS數據分析軟件進行單因素方差分析并進行Duncan多重比較。

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